啤酒釀造過程中生物胺的產(chǎn)生與控制研究
1 生物胺在生物體內(nèi)的生理作用
生物胺是一類含氮的脂肪族或雜環(huán)類低分子化合物,通常分為單胺和多胺兩大類。生物胺廣泛存在于各種動(dòng)植物的組織中,在人和動(dòng)物的生物活性細(xì)胞中發(fā)揮著重要的生理作用。
單胺化合物對(duì)血管和肌肉有明顯的舒張或收縮作用,能抑制癲痛的發(fā)作,對(duì)精神活動(dòng)和大腦皮層有重要的調(diào)節(jié)作用,對(duì)心臟有不同程度的正性肌力和正性頻率作用;多胺化合物在生物體的生長(zhǎng)過程中,能促進(jìn)DNA、RNA和蛋白質(zhì)的合成,加速生物的生長(zhǎng)發(fā)育。但當(dāng)人體吸收過量的生物胺時(shí),會(huì)引起頭痛、呼吸紊亂、心悸、血壓變化等過敏性反應(yīng)。在正常機(jī)體環(huán)境下,這些有害的影響會(huì)通過特殊氧化酶的作用減小到最低。
生物胺除了存在于各種動(dòng)植物的組織中,還普遍存在于許多食品和發(fā)酵酒中,如奶酪、肉制品、啤酒、葡萄酒、黃酒等。人們從食品中攝入的許多高質(zhì)量的外源性生物胺,能夠?qū)ζ渌胁煌靖弊饔玫奈镔|(zhì)產(chǎn)生一定的抑制作用。
2 啤酒中生物胺的產(chǎn)生過程
啤酒中的生物胺與啤酒原料的質(zhì)量、釀造工藝,以及釀造和貯藏過程中受微生物污染的程度密切相關(guān)。
根據(jù)啤酒中生物胺的原始組分,可將它們分為三類:第一類是來自原料中的,例如鯡精胺、腐胺、精胺和亞精胺等,它們通常存在于麥芽中,還有酪胺、2-苯乙胺和多元胺存在于酒花中;第二類是產(chǎn)生于糖化過程中的,例如酪胺、鯡精胺和尸胺等,它們的存在有助于麥芽中自然酶的產(chǎn)生和相應(yīng)氨基酸的分解;第三類是在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的,例如酪胺和色胺等。
2.1 幾種常見生物胺的含量
通過高效液相色譜儀可以對(duì)樣品啤酒中的生物胺進(jìn)行定量測(cè)試。結(jié)果表明:大部分歐洲啤酒中的生物胺含量都不超過20.0mg/L,波蘭啤酒的平均生物胺含量為16.35mg/L(最高可達(dá)20.93mg/L,最低僅為10.06mg/L)。就具體生物胺來看,在各種啤酒中普遍存在的是酪胺,罕見的是2-苯乙胺。捷克啤酒中腐胺的含量要比德國和意大利的高出許多。雖然這些胺被認(rèn)為是啤酒的自然組成成分,但由于各自生產(chǎn)工藝的不同,導(dǎo)致了啤酒中成分的差異,這也從客觀上形成了各種啤酒的特點(diǎn)。
在啤酒釀造過程中,產(chǎn)生適量的色胺、尸胺、組胺能夠改善啤酒的風(fēng)味,使其口味更清爽,但是高含量的色胺、尸胺、組胺提示釀造過程中受到過微生物的污染;啤酒中丙胺、吡咯胺的含量較高時(shí),其產(chǎn)生的不良?xì)馕秾?dǎo)致最終產(chǎn)品的味覺特性變差。
2.2 影響生物胺形成的因素
啤酒中生物胺的主要來源是氨基酸的脫羧反應(yīng),參與這一系列反應(yīng)的是各種微生物,其中乳酸菌的作用最為突出。乳酸菌通過對(duì)氨基酸的代謝作用,產(chǎn)生相應(yīng)的生物胺需要具備兩個(gè)基本條件:一是麥汁或啤酒中有足夠的氨基酸;二是乳酸菌要具有氨基酸脫羧酶活力。
2.2.1 底物氨基酸
在啤酒釀造過程中,為了保證酵母正常的生理功能需要,麥汁中必須有足夠的氨基酸,其中α-氨基酸應(yīng)保持在200mg/L左右。盡管麥汁中有豐富的氨基酸,但是啤酒酵母對(duì)各種氨基酸和亞氨基酸的同化效果是不同的,根據(jù)啤酒酵母對(duì)氨基酸的同化速率,可將麥汁中的氨基酸分為四組:
A組同化速率較快,同組氨基酸有絲氨酸、蘇氨酸、賴氨酸、精氨酸、天門冬氨酸、谷氨酸、頡氨酸;
B組同化速率中等,同組有蛋氨酸、亮氨酸、組氨酸、甘氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸;
C組同化速率較慢,同組有酪氨酸、色氨酸、丙氨酸;
D組同化速率則極微,如脯氨酸。
在啤酒發(fā)酵過程中,酵母對(duì)氨基酸的吸收,主要決定于麥汁中可同化氮的總量,其次是個(gè)別氨基酸的濃度。當(dāng)麥汁中的氨基酸濃度較高時(shí),發(fā)酵后,啤酒中將殘留較多的C組和D組氨基酸,經(jīng)乳酸菌的代謝后將被轉(zhuǎn)化為酪胺和色胺等相應(yīng)的生物胺。當(dāng)主發(fā)酵結(jié)束后,殘存的酵母部分發(fā)生自溶并釋放出多肽和游離氨基酸,在以乳酸菌為主的細(xì)菌的作用下,發(fā)生水解和脫羧反應(yīng),產(chǎn)生相當(dāng)數(shù)量的生物胺,其生成量隨著啤酒貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。
2.2.2 生物胺產(chǎn)生菌
從生物胺的產(chǎn)生途徑可知,除了來自原料中以外,其余都是在啤酒釀造過程中產(chǎn)生的,主要是在乳酸菌的代謝作用下產(chǎn)生。因?yàn)楹芏嗳樗峋鷮偌?xì)菌都具有氨基酸脫羧酶活力,在5'-磷酸毗哆醛為輔酶的條件下,脫去氨基酸中的羧基后得到相應(yīng)的胺。對(duì)于每一種生物胺來說,必然是某一種氨基酸脫羧酶代謝的結(jié)果,而對(duì)于每一種氨基酸脫氨酶來說,可能分別對(duì)幾種氨基酸都能產(chǎn)生代謝作用。比如,具有組氨酸脫羧酶活性的乳酸菌不僅能夠產(chǎn)生組胺,同時(shí)還能產(chǎn)生酪胺、腐胺等生物胺類,產(chǎn)酪胺能力強(qiáng)的菌株同時(shí)也能產(chǎn)生苯乙胺。
2.2.3 pH值
pH值對(duì)生物胺的產(chǎn)生具有顯著的調(diào)節(jié)作用,pH值不僅對(duì)啤酒中的乳酸菌類具有選擇作用,同時(shí)也關(guān)系到其它細(xì)菌的代謝活力和代謝方向。正常情況下冷麥芽汁的pH值在5.4左右,對(duì)于發(fā)酵初期的酵母菌來說尚未達(dá)到優(yōu)勢(shì)地位,此時(shí)很容易受到雜菌的感染,尤其是比較適應(yīng)較高pH值環(huán)境的細(xì)菌繁殖迅速,麥芽汁中較為豐富的氨基酸就會(huì)被代謝為相應(yīng)的生物胺。隨著發(fā)酵過程的延續(xù),發(fā)酵液的pH值逐漸下降,到啤酒發(fā)酵后期,pH值降到4.2左右,能夠耐受較低pH值環(huán)境的細(xì)菌成為產(chǎn)生生物胺的主導(dǎo)菌,在整個(gè)發(fā)酵過程中,乳酸菌群的代謝非常龐雜。
3 生物胺的控制措施
生物胺作為啤酒產(chǎn)品中的成分之一是客觀存在和無法避免的。作為生產(chǎn)者,為了給消費(fèi)者提供高質(zhì)量的產(chǎn)品,應(yīng)主動(dòng)在釀造過程中采取適當(dāng)措施加以限制。
3.1 限定麥芽汁中氨基酸的含量
為了滿足酵母在發(fā)酵過程中的生理需要和對(duì)雙乙酞的反饋抑制,糖化時(shí)特別強(qiáng)調(diào)麥汁中α-氨基酸的含量,這個(gè)量以夠用為度,通常應(yīng)保持在200mg/L左右,根據(jù)品種、工藝、酵母菌種的不同,可適當(dāng)調(diào)整。
3.2 加強(qiáng)衛(wèi)生管理防止染菌
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