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啤酒酵母的分離選育

華夏酒報 2008-02-18 18:11 釀酒科技
啤酒酵母是啤酒的命脈,它的優劣直接影響啤酒的質量。因此,啤酒酵母的分離選育工作至關重要,但要取得優良的菌種并將其長期使用卻并非易事。哈爾濱啤酒(佳木斯佳鳳)有限公司的菌種具有獨特的風格,但它也有許多不足之處,如:最近酵母的死亡率偏高,導致酒的一系列不
啤酒酵母是啤酒的命脈,它的優劣直接影響啤酒的質量。因此,啤酒酵母的分離選育工作至關重要,但要取得優良的菌種并將其長期使用卻并非易事。哈爾濱啤酒(佳木斯佳鳳)有限公司的菌種具有獨特的風格,但它也有許多不足之處,如:最近酵母的死亡率偏高,導致酒的一系列不良反應,針對這個問題,公司培菌室通過分離選育,篩選出更優的菌株,解決了這個難題,現將分離選育過程簡述如下:
     一、用無菌容器取發酵旺盛的二代酵母發酵液,放于4℃冰箱冷儲24hr后傾去上清液。
     二、用接種環取沉淀好的中層酵母泥接種于事先處理好的10mL麥芽汁液體培養基中搖勻,然后取1mL稀釋液加入9mL麥芽汁液體培養基中搖勻,依次類推,做梯度稀釋。
     三、從10-4、10-5的試管中取適量注入事先倒好凝固的瓊脂培養基上制平板,涂布均勻后用紙包好,倒置于25℃培養箱中培養3至4天。
     培養期間應每天觀察菌落生長情況,剔除不理想的平板,待菌落生長至3mm時,進行挑選菌落。每個平板的菌落應在20至30個之間,菌落過多,影響酵母菌對營養成分的吸收,會造成營養不良。選取的菌落應呈乳白色,表面光滑、濕潤,邊緣較整齊且中等偏大。不要選取偏大或偏小的菌落,因為偏大的菌落營養過于旺盛,性能趨向衰老,而偏小的菌落屬于營養不良型的。選中的菌落在顯微鏡下觀察應是:細胞膜薄,大小均勻,細胞質透明,空胞少。
     選中的菌落用接種環轉接到斜面培養基上,并編好號碼移入25℃培養箱內培養3至5天,待菌落長豐滿后移入0-4℃冰箱中保存。同時將選中的菌落接種于5mL液體培養基中,放于25℃培養箱中培養24hr,然后取1mL接入150mL液體培養基中,同時接兩個,放在與大生產相同的溫度下培養36hr和72hr后,分別測降糖速率(見表1)。
     由表1降糖速率選出的優良菌株,進行下一步發酵試驗。
     近年來,高濃度發酵已成為啤酒釀造的一個發展趨勢,由于高濃度發酵能在利用原有設備的基礎上,不需增加太大的投資即可使產量增加30%左右,而且在啤酒風味的穩定性方面也能更好的控制一致,因此,越來越多的廠家都趨向使用高濃度發酵以獲取更大的產量和利潤。所以,我們根據這一需要,決定采用高濃馴養。因為酵母有“就低不就高”的原則,即高濃酵母可以用于低濃發酵,但低濃酵母不適合高濃發酵。
     由降糖速率選中的菌株從斜面轉接入10mL液體培養基中,放于25℃培養箱中培養24hr,然后再活化一次轉接入100mL液體培養基中,放于20℃培養箱中培養24hr,再轉接入400mL液體培養基中,置于18℃培養箱中培養24hr后移入2000mL液體培養基中,接著轉入與大生產相同的溫度培養。每天定時搖晃三角瓶,使酵母充分分散,促進發酵進程。發酵第二天開始測雙乙酰,因為雙乙酰是酵母代謝過程中產生的物質,它對啤酒的質量有重要的影響,因此,選擇雙乙酰還原快的菌株也非常重要。連續測4天雙乙酰,找出各菌株的峰值(見表2)。
  發酵結束后檢測各菌株的發酵度、雙乙酰及凝聚性(見表3)。
     由此篩選出發酵度高、降糖快、雙乙酰還原快、凝聚性較強的理想菌株。進一步測死亡率及死滅溫度,死滅溫度均為52℃。死亡率如下(見表4)。
     由表4可知,選出的理想菌株進行第二次分離選育。在選育過程中根據酵母菌種的不同,可以在培養基中適當添加酵母所需的營養鹽。
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